低于 80% 先暫停使用該批次數據，優先排查基質抑制、加標不當和標準品稀釋不匹配**。ELISA 回收率常用可接受范圍為 **80%—120%**，低于此范圍說明樣本成分可能壓低了信號

**按這個順序排查**

- **重算一遍**：用“測得濃度－本底濃度"除以加入濃度。本底取復孔均值，避免單孔波動影響結果。
- **檢查加標操作**：加標體積盡量不超過樣品體積的 1%，并充分混勻。體積過大或混合不充分都會拉低回收率[^1]。
- **檢查標準品**：確認復溶、稀釋和有效期。標準品降解或稀釋偏差，會同時造成整板回收率偏低。
- **做基質匹配曲線**：用同批次陰性樣本或試劑盒基質稀釋液配制標準品。純緩沖液曲線遇到血清、血漿或細胞上清時，容易出現系統性偏低[^7]。
- **稀釋樣本重新測試**：先用標準品稀釋液按 1:2 稀釋；仍偏低再試 1:5、1:10。稀釋后需在標準曲線有效范圍內，最終結果乘以稀釋倍數[^9]。
- **調整樣本處理**：離心去除沉淀，檢查 pH 是否處于 6—8，降低去垢劑、高鹽或蛋白濃度。抗原抗體反應對 pH 和緩沖環境較敏感[^26]。

**怎么判斷是哪種原因**

標準曲線正常、只有加標樣本偏低，重點懷疑**基質效應或加標體積問題**。標準曲線也差，則優先查**標準品、稀釋梯度、溫育和顯色步驟**。

如果優化后仍持續低于 80%，說明該試劑盒與當前樣本兼容性較差，可更換更適配的試劑盒。回收率異常反映的是系統誤差，**直接用固定系數校正原始數據可靠性有限